對微生物限度檢測儀的滅菌(尤其是流體管路和濾杯底座)是確保檢測結果準確性的關鍵步驟,需根據(jù)儀器材質、結構及實驗室條件選擇合適的方法。以下是詳細的滅菌操作指南:
一、滅菌前的準備
拆卸與清潔
按儀器說明書拆卸可拆卸部件(如濾杯、密封圈、連接管等)。
用純化水沖洗殘留樣品,頑固污漬可用軟毛刷或中性洗滌劑浸泡后沖洗,避免劃傷管路內(nèi)壁。
確保所有部件無可見雜質,防止滅菌時雜質焦化影響效果。
檢查部件完整性
確認管路無破損、濾杯底座密封面無裂紋,避免滅菌過程中泄漏或滅菌不徹底。
二、針對流體管路的滅菌方法
流體管路多為硅膠、PTFE(聚四氟乙烯)等耐高溫、耐化學腐蝕材質,常用滅菌方式如下:
1. 濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)
適用場景:管路可拆卸、能耐受 121℃高溫高壓的情況。
操作步驟:
將管路纏繞整齊,避免折疊堵塞,放入滅菌袋并密封(留少量排氣空間)。
滅菌參數(shù):121℃、103.4kPa(15psi),維持 20-30 分鐘(根據(jù)管路長度和容積調整)。
滅菌后自然冷卻,避免驟冷導致管路開裂,無菌操作取出備用。
優(yōu)點:滅菌徹底,適用于大多數(shù)微生物(包括芽孢)。
2. 一般實驗結束后將消毒液倒入濾杯進行過濾滅菌即可。
三、針對濾杯底座的滅菌方法
濾杯底座與濾膜接觸,是微生物截留的關鍵區(qū)域,需重點滅菌:
1. 干熱滅菌
適用場景:底座為不銹鋼等耐高溫材質(耐受 160-180℃)。
操作步驟:
將火焰噴槍對底座進行高溫滅菌即可
2. 濕熱滅菌(同管路方法)
若底座為耐高溫且耐潮濕材質(如不銹鋼),可與管路一同進行高壓蒸汽滅菌,注意用紗布包裹避免碰撞變形。
3. 灼燒滅菌(僅限金屬底座)
用 75% 乙醇擦拭底座后,置于酒精燈火焰上灼燒至紅熱,冷卻后使用(適用于緊急情況或小范圍滅菌)。
注意:避免灼燒密封圈等不耐高溫部件,需提前拆卸。
四、滅菌后的驗證與維護
無菌性驗證
定期進行生物指示劑驗證(如枯草芽孢桿菌黑色變種孢子),將指示劑置于管路或底座最難滅菌的位置,滅菌后培養(yǎng)觀察是否存活。
日??赏ㄟ^空白對照試驗:用無菌水模擬檢測流程,培養(yǎng)后觀察是否有菌生長。
維護保養(yǎng)
滅菌后及時組裝儀器,避免部件暴露在空氣中過久。
長期不用時,需將管路和底座干燥后存放,硅膠管路可涂抹少量無菌硅油防止老化。
五、注意事項
不同材質耐受的滅菌方式不同(如塑料濾杯可能僅耐化學滅菌),需嚴格參照儀器說明書。
滅菌過程中避免接觸腐蝕性試劑(如含氯消毒劑),防止管路或底座被腐蝕。
無菌操作時需戴無菌手套,避免手部污染已滅菌部件。
通過以上方法,可有效殺滅微生物限度檢測儀關鍵部位的微生物,確保檢測結果的可靠性。